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實驗室設(shè)計
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PCR實驗室設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范

作者:科藝普實驗室設(shè)計集團(tuán) 來源:www.farooo.com 時間:2022-07-14 11:29:49 閱讀:678次

[導(dǎo)讀]:PCR實驗室通常采用非單向流送風(fēng)方式,所謂非單向流,指氣流流線方向不平行,風(fēng)速也不一致。非單向流的氣流組織方式有上送下回式、上送下側(cè)回式、測送下回式、上送上回式、PCR實驗室一般采用上送下回式。上部送風(fēng)依靠高效送風(fēng)口進(jìn)入房間,下部回風(fēng)依靠每個房間的對稱分布的排風(fēng)柱下部的排風(fēng)口排風(fēng)。

 PCR實驗室通常采用非單向流送風(fēng)方式,所謂非單向流,指氣流流線方向不平行,風(fēng)速也不一致。非單向流的氣流組織方式有上送下回式、上送下側(cè)回式、測送下回式、上送上回式、PCR實驗室一般采用上送下回式。上部送風(fēng)依靠高效送風(fēng)口進(jìn)入房間,下部回風(fēng)依靠每個房間的對稱分布的排風(fēng)柱下部的排風(fēng)口排風(fēng)。

 目前PCR應(yīng)用已得到長足的發(fā)展,已成為疫病診斷,疫情控制等方面的有力工具,為了避免在PCR方法中出現(xiàn)污染及出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果等現(xiàn)象,保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,在實驗室環(huán)境安全控制上嚴(yán)格做到實驗室獨立區(qū)域設(shè)計,功能分區(qū)明確,保證實驗室潔凈環(huán)境,人流物流嚴(yán)格分流,設(shè)計合理的壓力梯度,形成有序的氣流組織方向,切實做到避免交叉污染。

 PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction)的簡稱,是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。

 避免污染是PCR實驗室設(shè)計建設(shè)首要考慮重點

 由于PCR技術(shù)的高度敏感性,PCR技術(shù)要求高、影響因素多,從樣品制備到結(jié)果的產(chǎn)生,任何一處細(xì)微的失誤均會造成結(jié)果的偏差,導(dǎo)致樣品的假陽性和假陰性結(jié)果。

 PCR實驗室研究過程中,很多操作都會產(chǎn)生氣溶膠,比如離心、混勻等操作閔。為保證環(huán)境安全,PCR實驗室設(shè)計建設(shè)需獨立區(qū)域設(shè)計,避免與其余環(huán)境的交叉混雜,下面SICOLAB根據(jù)我們做過的工程實例從平面布局、凈化區(qū)域劃分,人物流設(shè)計和壓差控制等方面具體介紹。

 一丶PCR實驗室區(qū)域劃分

 1、功能劃分

 試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)、純化區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)、后純化區(qū)(如上布局圖)。

 2、SICOLAB設(shè)計原則

 按國家衛(wèi)生部的要求,各實驗區(qū)域必須是相互獨立的,不能直通,每個獨立實驗區(qū)設(shè)有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋,進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向順序,即只能從左邊試劑準(zhǔn)備區(qū),標(biāo)本制備區(qū),擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū),純化區(qū),擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)到后純化區(qū),避免發(fā)生交叉污染。

 3、為避免樣本間的交叉污染,房間采取凈化控制,總體設(shè)計為10萬級。閘間(緩沖間)設(shè)計為正壓區(qū),保證與外界環(huán)境隔離,避免從鄰近區(qū)域進(jìn)入本區(qū)域的氣溶膠污染。

 二、氣流設(shè)計

 人流物流設(shè)計各行其道,避免交叉混雜,整個區(qū)域設(shè)計一個公用走廊,工作區(qū)域之間設(shè)計試劑物品傳遞專用窗,做到人物分流。

 1、物流:在試劑準(zhǔn)備區(qū)與標(biāo)本制備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)與PCR擴(kuò)增區(qū)之間,以及擴(kuò)增區(qū)域和純化區(qū)之間設(shè)計有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,以單向進(jìn)行試劑、標(biāo)本等物品傳送,配制的試劑通過單向傳遞窗由試劑準(zhǔn)備區(qū)傳遞到標(biāo)本制備區(qū),處理過的標(biāo)本通過單向傳遞窗由標(biāo)本制備區(qū)傳遞到PCR擴(kuò)增區(qū),按照工藝流程逐次傳遞,避免返流。單向物品傳送系統(tǒng)既保障了標(biāo)本試劑不受污染,又保障了標(biāo)本試劑不污染環(huán)境。

 2、人流:人員通過閘間分別進(jìn)入各自實驗區(qū)域,進(jìn)出各實驗區(qū)域需要在閘間區(qū)域更換潔凈工作服,手消毒等。

 三、壓差設(shè)計

 PCR實驗室應(yīng)設(shè)計為負(fù)壓潔凈室,通過壓差控制,使整個PCR實驗過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染,并且降低擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

 各個實驗室與非潔凈區(qū)之間的閘間保持正壓,>10Pa,實驗與閘間之間的氣流組織方向為:試劑準(zhǔn)備區(qū)空氣流向閘間,標(biāo)本制備區(qū)流向閘間,而PCR擴(kuò)增區(qū)氣流方向由閘間流向PCR擴(kuò)增區(qū),純化區(qū)同理;

 同時按照試劑單向流方向,各個實驗室之間設(shè)計不同壓力梯度來實現(xiàn)單向氣流組織方向,由試劑準(zhǔn)備區(qū)(+20Pa)、標(biāo)本制備區(qū)(+15Pa)、擴(kuò)增反應(yīng)一區(qū)(-5Pa)、純化區(qū)(-10Pa)、擴(kuò)增反應(yīng)二區(qū)(-20Pa)、到后純化區(qū)(-25Pa)壓力逐漸降低,形成單向負(fù)壓壓力梯度。

 四、其它安全設(shè)施

 PCR實驗室為潔凈空調(diào)系統(tǒng),系統(tǒng)形式采用直流系統(tǒng)不回風(fēng),防止交叉污染;試劑準(zhǔn)備間設(shè)計超凈臺,保證試劑免受空氣環(huán)境污染;標(biāo)本制備間設(shè)計生物安全柜,保證標(biāo)本不污染室內(nèi)環(huán)境,并保證標(biāo)本免受環(huán)境污染。

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